槲皮素预处理对衣霉素所致巨噬细胞凋亡的抑制作用及机制

• 作者: 刘庆华 姚树桐 方永奇 李妍妍 王芸芸 田华 秦树存 苗成 马变颖
• 来源期刊: 生理学报
• 学科: 医学
• 关键词: 槲皮素 内质网应激 C/EBP同源蛋白 衣霉素 巨噬细胞 凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 47-54
• 页数: 8页
• 分类号: R331.3|R363.2|R332
• 语种: 中文

摘要

本文旨在研究槲皮素(quercetin,QUE)预处理对内质网应激诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)所致RAW264.7巨噬细胞凋亡的抑制作用,并探讨可能的分子机制.体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予20、40和80 μmol/L QUE预处理30 min,再加入5 mg/L TM继续培养12h.分别采用MTT法和Annexin V-FITC双染法检测细胞活力和凋亡情况；免疫荧光细胞化学法和免疫印迹法检测转录激活因子6 (activating transcription factor 6,ATF6)核转位情况；分别采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)技术检测促凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白及mRNA表达变化.结果显示,QUE (40和80 μmol/L)预处理显著抑制TM所诱导的细胞活力降低和凋亡.与TM处理组比较,QUE预处理组内质网应激感受器ATF6由胞浆向核内转移明显减弱.TM在蛋白和转录水平均明显上调CHOP表达,并下调Bcl-2表达,而QUE则明显抑制上述变化,且呈浓度依赖性.以上结果表明,QUE可减轻TM所诱导的RAW264.7巨噬细胞凋亡,可能是部分通过抑制ATF6-CHOP信号途径实现的.