萨尔瓦多型银合欢种子胰蛋白酶抑制剂的分离纯化与性质研究

• 作者: 冯进辉 吴洽庆 牛可钦 鲍锦库
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 胰蛋白酶抑制剂 萨尔瓦多型银合欢 温度耐受性 pH耐受性 抑制动力学 圆二色谱
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 1109-1118
• 页数: 10页
• 分类号: Q946.1
• 字数: 6641字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2013.05.037

摘要

本研究从萨尔瓦多型银合欢(Leucaena leucocephala cv.Salvador)种子中分离纯化出一种新的胰蛋白酶抑制剂,即萨尔瓦多型银合欢种子胰蛋白抑制剂(Trypsin Inhibitor fromLeucaena leucocephala cv.Salvador seeds,LlsTI).成熟的种子经粉碎,生理盐水浸提之后,经CM-Sepharose阳离子交换层析得到LlsTI纯品.该胰蛋白抑制剂为19.8 kDa的单体蛋白,其N末端测序结果为KGSYLRDVRG,而其内部则含有一段KTAPLVVGFLK的序列,与已知的蛋白酶抑制剂序列都不同,表明LlsTI为一种新的胰蛋白酶抑制剂,同时也含有一部分与已知Kunitz型抑制剂相保守的碱基.LlsTI对胰蛋白酶的摩尔抑制比近似为1∶1.其对于胰蛋白酶属竞争性抑制剂,其Ki值为2.77×10-10 M.LlsTI对胰蛋白酶的抑制活力表现出对高温和pH变化较高的耐受性.但其活性受100 mM DTT影响.本研究对LlsTI对其它丝氨酸类蛋白酶的抑制作用也做了测定,其中只有胰蛋白酶的活性受到了抑制.根据圆二色谱的分析结果,LlsTI是一种αβ蛋白,其二级结构在室温下的水和缓冲液Tris-HCl (pH7.5)中组成相似.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍锦库	四川大学生命科学学院	48	236	8.0	13.0
2	吴洽庆	中国科学院天津工业生物技术研究所	14	63	4.0	7.0
3	牛可钦	四川大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0
4	冯进辉	中国科学院天津工业生物技术研究所	5	4	1.0	1.0