中华绒螯蟹精巢特异表达蛋白DMRT-like:抗体制备及免疫鉴定

• 作者: 邱高峰 陈洁
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中华绒螯蟹 EsDMRT-like蛋白 原核表达 抗体制备 精巢分化
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 63-69
• 分类号: Q511|S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2013.38047

摘要

Dmrt是性别调控因子Doublesex和Mab-3的相关基因,近年报道了中华绒螯蟹EsDmrt-like只在精巢中表达,为了验证EsDMRT-like蛋白是否在中华绒螯蟹精巢中特异表达及其功能,根据中华绒螯蟹EsDmrt-like基因序列,构建重组质粒pET-32a-EsDmrt-like,转化大肠杆菌BL21,经融合表达和SDS-PAGE分析表明,融合蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为46ku.利用Ni柱亲和纯化融合蛋白免疫家兔,制备获得EsDMRT-like多克隆抗体.Western-blotting检测表明该抗体既能特异地识别重组蛋白,又能特异识别精巢中EsDMRT-like蛋白,并且该抗体仅在精巢中检测到EsDMRT-like蛋白的表达,分子量约为52 ku,为预期单体分子量的二倍.Western-blotting检测变性后精巢总蛋白,该抗体能识别52和34 ku两条条带,证明了二聚体的存在.这一结果暗示EsDMRT-like可能通过形成二聚体形式调控中华绒螯蟹精巢发育.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱高峰	上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室	16	78	5.0	8.0
2	陈洁	上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室	9	85	5.0	9.0