PACAP衍生多肽RDB的高效制备及其改善胰岛素抵抗作用的初步研究

• 作者: 叶祖禄 徐文娜 洪岸 罗天杰 饶磊 马义
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 垂体腺苷酸环化酶激活肽 基因工程 3T3-L1细胞 胰岛素抵抗 重组衍生物
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 141-145
• 页数: 5页
• 分类号: Q516
• 语种: 中文

摘要

为了制备垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)衍生多肽RDB并初步研究其改善脂肪细胞胰岛素抵抗的作用,利用基因工程技术,选用大肠杆菌偏爱密码子,以重叠延伸PCR方法合成RDB基因序列,定向插入到高效表达载体pKYB-MCS中,用大肠杆菌ER2566进行表达,融合蛋白经Chitin-Beads柱纯化后,利用β-巯基乙醇诱导蛋白内含肽的N端自剪切,释放目的肽,再用HPLC制备纯度较高的PACAP衍生多肽RDB,实现RDB的高效制备；利用制备的重组肽RDB研究其对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的改善作用及初步机制.制备的重组肽RDB的Mr为3.990 k,纯度大于95％,其产率为17.3 mg/L发酵产物；制备的RDB可明显促进胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖利用及信号分子IRS-1的表达.结果表明在确立的优化条件下可高效制备纯度较高的PACAP衍生多肽RDB(纯度≥95％),RDB能改善胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的胰岛素敏感性,其作用机制与胰岛素信号通路相关蛋白的表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪岸		107	856	14.0	25.0
2	马义		38	182	8.0	11.0
3	饶磊		3	0	0.0	0.0
4	罗天杰		4	0	0.0	0.0
5	叶祖禄		3	0	0.0	0.0
6	徐文娜		3	0	0.0	0.0