新生仔猪口腔黏膜上皮细胞的体外培养方法

• 作者: 崔红杰 张彦明 郭抗抗 马瑞丽
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 口腔黏膜上皮细胞 体外培养 DispaseⅡ联合组织块培养法 新生仔猪
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 1445-1453
• 页数: 9页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 7338字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.09.016

摘要

为了建立仔猪口腔黏膜上皮细胞(oral mucosal epithelial cells,OMEC)的体外培养方法,取新生仔猪的口腔颊膜组织,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶消化法、DispaseⅡ和胰蛋白酶联合消化培养法、DispaseⅡ处理联合组织块培养法,对口腔黏膜上皮细胞进行原代和传代培养,用倒置显微镜观察培养细胞形态学特征及生长情况,对传代培养的OMEC,采用间接免疫荧光法检测广谱细胞角蛋白的表达情况,并进行透射电镜观察,用MTT法测定细胞的生长曲线,流式细胞仪检测其细胞周期.结果表明,在采用相同培养基条件下,采用组织块培养法、胰蛋白酶消化法不能成功培养仔猪OMEC,用DispaseⅡ和胰蛋白酶联合消化法培养的细胞不易贴壁,培养困难,采用DispaseⅡ处理联合组织块培养法培养的细胞增殖能力强,细胞纯度高,可连续传到10～11代,经鉴定具有OMEC特征.本试验成功建立了仔猪口腔黏膜上皮细胞的原代及传代培养方法,为进一步研究OMEC的永生化及猪口蹄疫致病机理和疫苗提供理想实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦明	西北农林科技大学动物医学院	256	1530	16.0	24.0
2	郭抗抗	西北农林科技大学动物医学院	109	484	12.0	16.0
3	马瑞丽	西北农林科技大学动物医学院	6	18	3.0	4.0
7	崔红杰	西北农林科技大学动物医学院	1	1	1.0	1.0