人源血管内皮生长因子突变体Ⅱ的克隆表达、分离纯化及初步鉴定

• 作者: 张鹏 徐茂磊 曹荣月 胡晓利 邢芸 陈檬 黄巧玲
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管内皮细胞生长因子 突变体 免疫原性 抗血管新生 抗肿瘤 包涵体
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 194-197
• 页数: 4页
• 分类号: Q5|Q78
• 语种: 中文

摘要

构建人源血管内皮生长因子突变体hVEGF121Ⅱ的重组原核表达质粒,获得hVEGF121Ⅱ蛋白用于制备抗血管生成作用更强的抗肿瘤疫苗.利用PCR技术,在已构建的hVEGF121 Ⅰ突变体的基因末端引入热休克蛋白mHSP70的407-426两段串联重复序列的编码基因,PCR产物经Hind Ⅲ和Nco Ⅰ双酶切后连接到经同样限制性内切酶切过的原核表达载体pET-28a(+)上,转入大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,乳糖诱导表达,超声破碎菌体,包涵体经洗涤、溶解、稀释复性、离子交换层析得到目的蛋白hVEGF121Ⅱ,Western-blot鉴定.结果成功构建了hVEGF121Ⅱ蛋白的表达质粒pET-28a(+)-hVEGF121Ⅱ,重组菌株经乳糖诱导后,目的蛋白表达量占全菌蛋白的62％,分离纯化后纯度达到95％.hVEGF121Ⅱ蛋白的单体和二聚体都可以和VEGF抗体结合.重组hVEGF121Ⅱ蛋白的表达成功为进一步对其进行免疫学研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹荣月		61	129	6.0	8.0
2	邢芸		13	15	2.0	3.0
3	张鹏		4	23	2.0	4.0
4	徐茂磊		3	0	0.0	0.0
5	陈檬		3	3	1.0	1.0
6	胡晓利		1	0	0.0	0.0
7	黄巧玲		2	0	0.0	0.0