无患子基因组DNA提取及ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 刘献勇 卢新坤 叶新福 姜业先 姜翠翠 方智振 郭有枝
• 来源期刊: 福建果树
• 关键词: 无患子 ISSR 正交优化 PCR反应体系
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 19-23
• 页数: 5页
• 字数: 2302字
• 语种: 中文

摘要

应用改良CTAB法提取了无患子基因组DNA,该方法具有操作过程简单、耗时少、能有效降低无患子基因组DNA提取过程中酚类化合物、多糖等杂质的污染.正交试验研究了dNTP浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶这3个因素对ISSR-PCR反应的影响,建立并优化了适合于无患子ISSR-PCR的反应体系.优化的反应总体系20μl含1 ×PCR Buffer,0.4 mmol· L-1 dNTP,0.8μmol· L-1引物,0.75 U Taq DNA聚合酶,20 ng DNA模板.使用此ISSR扩增反应体系,获得了部分不同种质无患子DNA的清晰条带,验证了该体系的稳定性.优化的反应体系为后续无患子遗传多样性的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢新坤	福建省农业科学院果树研究所	50	247	9.0	11.0
2	方智振	福建省农业科学院果树研究所	33	125	5.0	10.0
3	姜翠翠	福建省农业科学院果树研究所	51	220	8.0	12.0
4	叶新福	福建省农业科学院果树研究所	119	505	11.0	17.0
5	郭有枝		4	47	3.0	4.0
6	姜业先		3	15	2.0	3.0
7	刘献勇		2	6	2.0	2.0