bgtfA在东方拟无枝酸菌中异源表达及其产物鉴定

• 作者: 徐莉 戈梅 李彦美 许激扬 陈代杰 魏维
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 糖基转移酶 异源表达 底物宽泛性 东方拟无枝酸菌 糖肽类抗生素
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 207-209
• 页数: 3页
• 分类号: R978.1
• 语种: 中文

摘要

在万古霉素产生菌东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)中异源表达Balhimycin产生菌来源的糖基转移酶基因bgtfA,从而在工程菌发酵液中获得杂合万古霉素,以探索糖基转移酶BgtfA能否作为一个独立的元件在异源宿主中发挥催化作用.首先将bgtfA基因克隆至载体质粒pULVK2AE,构建重组质粒pLYEBA2AE,然后采用电转化方法将质粒导入东方拟无枝酸菌,用HPLC和LC-MS检测、验证工程菌发酵液中是否存在BgtfA的催化产物.成功地在东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)异源表达bgtfA基因,经HPLC和LC-MS检测分析,在工程菌的发酵液中获得预期的BgtfA催化产物,杂合万古霉素LYV07ww01.这表明BgtfA有一定的底物宽泛性,不仅能够催化表万古糖胺与balhimycin苷元的连接,还能催化万古糖胺连接至万古苷元.