拟南芥At-pri-miR828基因的克隆及其对番茄的遗传转化

• 作者: 于治芹 唐贵良 张莉 李润植 梁建萍 贺立恒 贾小云 金雷皓
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄 miR828 Sly-myb-like1 花青素 实时定量PCR
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 蔬菜
• 页码范围: 2419-2428
• 分类号: S641.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0513-353X.2013.12.009

摘要

MicroRNA828(miRNA828)是一种新近发现的生物学功能还未全面研究的miRNA.为从不同角度阐明miRNA828的生物学功能,从拟南芥中克隆到At-pri-miR828基因并构建了该基因过量表达的植物表达载体pC2300-pOT2-At-pri-miR828,通过农杆菌介导的叶盘法将pC2300-pOT2-At-pri-miR828导入异源植物番茄品种‘Ailsa Craig’中.PCR鉴定结果显示,外源基因At-pri-miR828已成功整合到转基因番茄基因组中,共获得9个转基因株系,67株转基因植株.定量PCR检测结果显示,与野生型番茄植株相比,转基因植株中miR828的表达量显著增加,而生物信息学所预测的miR828靶基因Sly-myb-like1的表达水平则相应降低.花青素含量测定结果显示,miR828过量表达的转基因番茄植株花青素含量明显低于野生型植株,表明miR828参与了番茄花青素的生物合成调控.