兔羊膜成体干细胞培养及体外定向诱导神经细胞分化

• 作者: 刘思维 徐蔚 曲申 王培军 王震
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 成体干细胞/细胞学 细胞分化/免疫学 细胞培养技术/方法 羊膜
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 296-299
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1|R392-33
• 字数: 4048字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2013.03.015

摘要

目的 观察体外分离、培养的兔羊膜成体干细胞(ADSC)定向诱导神经细胞的分化结果.方法 新西兰雌兔羊膜分离、培养ADSC.实时定量聚合酶链反应(PCR)检测羊膜ADSC的纤连蛋白(Fibronectin)、巢蛋白(Nestin)、波形蛋白(Vimentin) mRNA的表达水平.单克隆形成实验证实羊膜ADSC是否具有自我复制能力.培养成功的ADSC中加入神经分化诱导培养基诱导神经细胞分化.诱导分化5d后,免疫荧光染色检测β-微管蛋白(tubulin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 培养的ADSC在24 h后逐渐从羊膜组织中移行出；72 h可见明显的多角形细胞富集在羊膜组织周边；120 h后多角形细胞致密地分布于羊膜四周.分裂后的子代细胞形态同父代细胞.单克隆形成实验结果证实羊膜ADSC具有自我复制能力.实时定量PCR检测结果显示,羊膜ADSC的Nestin、Vimentin、Fibronectin mRNA分别是脾脏细胞同种分子表达量的15.79、1.91、7.65倍,两者差异有统计学意义(Z=-5.243、-3.972、-2.524,P＜0.05).免疫荧光染色结果显示,β-tubulin在大部分细胞的胞质中表达；GFAP在部分细胞的细胞质中表达.结论 羊膜ADSC具有自我复制能力,在合适条件下能够分化成神经元和神经胶质细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王培军	同济大学附属同济医院眼科	167	1180	16.0	25.0
2	徐蔚	同济大学附属同济医院眼科	26	161	8.0	11.0
3	王震	同济大学附属同济医院眼科	31	188	7.0	13.0
4	曲申	同济大学附属同济医院眼科	13	44	4.0	6.0
5	刘思维	同济大学附属同济医院眼科	8	19	3.0	4.0