温敏载体固定化木瓜蛋白酶的特性及其消化HCG抗体的应用

• 作者: 应国清 易喻 朱克寅 梅建凤 陈建澍 黄婷婷
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 木瓜蛋白酶 固定化 温敏性载体 抗体片段化 聚(N-异丙基丙烯酰胺) 酶学性质
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 210-214
• 页数: 5页
• 分类号: Q814.2
• 语种: 中文

摘要

以温敏性材料N-羟基琥珀酰亚胺活化的聚(N-异丙基丙烯酰胺)为载体制备固定化木瓜蛋白酶,对其酶学性质进行了研究.结果表明:固定化酶的最适pH值为7.5,最适温度为65 ℃,米氏常数为2.72 mg/mL;经过24次温敏循环操作,剩余相对活力86.6％；在4℃条件下放置60d,剩余相对活力为71.5％.与游离酶相比,固定化酶pH值稳定性、热稳定性、操作稳定性和储存稳定性都有显著提高.将此固定化酶应用于HCG单克隆抗体消化,与纤维素固定化酶相比,水解能力更强,更适合于大分子的酶解,特别是抗体片段的制备.