鸡胚胎干细胞无饲养层培养体系的建立及其转染体系的优化

• 作者: 张亚妮 施青青 李伟 李碧春 王丹 郑蒙蒙
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 胚胎干细胞 无饲养层培养体系 脂质体 优化转染 鸡
• 年，卷（期）: 2013,（17）
• 所属期刊栏目: 繁殖生理
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: S831.3
• 字数: 3964字
• 语种: 中文

摘要

鸡胚胎干细胞(cES)以其全能性,在研究胚胎发育生物学和家禽育种等方面有巨大的应用前景.本实验旨在建立cES无饲养层培养体系和对LipofactiminTM LTX(脂质体)介导转染体系进行优化.采用药匙法从新鲜受精蛋中分离获取cES,接种于层粘连蛋白包被的培养皿,待形成大克隆后,用口吸管剥离法吸取cES克隆进行消化传代,并采用生化和免疫学方法鉴定其干细胞活性.设计质粒量800、900、1 000ng 3个水平,质粒、脂质体比为1∶1.5、1∶2、1∶2.5体系转染cES.结果表明:无饲养层培养体系体外培养cES细胞能稳定传代至第6代,鉴定结果显示碱性磷酸酶阳性和阶段特异性胚胎抗原1阳性,指明克隆能保持未分化状态;质粒900 ng、质脂比为1∶2时,可获得最佳转染效率72％,为cES的脂质体介导外源基因的转染提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李碧春	扬州大学动物科学与技术学院	189	1267	18.0	27.0
2	施青青	扬州大学动物科学与技术学院	11	63	4.0	7.0
3	李伟	扬州大学动物科学与技术学院	59	185	8.0	10.0
4	王丹	扬州大学动物科学与技术学院	48	68	5.0	5.0
5	张亚妮	扬州大学动物科学与技术学院	40	56	4.0	6.0
6	郑蒙蒙	扬州大学动物科学与技术学院	6	16	3.0	4.0