人类精子高质量RNA提取方案的优化

• 作者: 于艳 孙伟 张斌 杨丽霞 杨伟娜 管群 菅福琴 闻姬
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 精子 RNA 男性不育 功能基因
• 年，卷（期）: 2013,（21）
• 所属期刊栏目: 检验与临床
• 页码范围: 3589-3593
• 页数: 5页
• 字数: 3810字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2013.21.053

摘要

目的:人类精子所含RNA极少量,且由于精子中圆形细胞存在,使得分离精子RNA具有一定的挑战性.本研究旨在优化人类精子RNA的提取方案.方法:利用40％的单层梯度液及精子洗涤液纯化精子,使用TRIzol试剂和RNeasy Mini Kit提取RNA,反转录精子RNA,以eDNA为模板扩增PRM2、c-Kit、CD45、CDH1基因来确定所提精子RNA中是否存在基因组DNA或体细胞RNA的污染.结果:利用3倍体积的40％单层梯度液及精子洗涤液可以完全去除精液中体细胞的污染,利用TRIzol试剂提取RNA比RNeasy Mini Kit更有效.结论:人类精子中含有微量RNA,此方法既经济又有效,可以提取高质量的精子RNA,为人类男性生殖的功能基因组研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙伟		114	785	16.0	23.0
2	张斌		24	120	6.0	10.0
3	闻姬		52	430	12.0	18.0
4	菅福琴		21	94	6.0	9.0
5	杨丽霞		14	55	4.0	7.0
6	管群		26	107	6.0	9.0
7	于艳		11	33	4.0	5.0
8	杨伟娜		9	41	4.0	6.0