人脂肪间充质干细胞的原代培养及体外成骨成脂诱导分化

• 作者: 张雪静 李遇梅 许辉 闵敏 马红
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人脂肪间充质干细胞 鉴定 成骨分化 成脂分化
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 185-190
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2
• 字数: 4106字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立体外分离培养获得人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs)的方法,并观察其形态、免疫表型、生物学特性.初步探讨其体外成骨过程中出现成脂现象的原因及机制.方法:剖宫产手术获得腹部皮下脂肪,0.15％Ⅰ型胶原酶消化法获得人脂肪间充质干细胞并进行体外培养.行MTT细胞增殖实验绘制增殖曲线,使用流式细胞及细胞免疫荧光技术检测细胞表面抗原,行成骨成脂分化鉴定其分化潜能.通过RT-PCR技术检测成骨成脂过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2 (peroxisome proliferator activated receptorγ-2,PPARγ-2)和骨桥蛋白mRNA表达情况.结果:通过分离培养,获得了大量旋涡状生长的人脂肪间充质干细胞.MTT法显示细胞增殖能力强.流式细胞鉴定结果显示,CD29、CD73、CD105、CD166高表达,CD31、CD34、CD45、HLA-DR低表达.细胞免疫荧光结果与之相符.hADSCs在特定诱导条件下,具有成骨成脂分化潜能.在成骨分化过程中同时伴有成脂发生.RT-PCR结果显示,与对照组相比,成脂诱导组PPARγ-2 mRNA有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P＜0.01).与对照组相比,成骨诱导组骨桥蛋白,PPARγ-2 mRNA均有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:建立了一种分离培养hADSCs简单可靠的方法.获得的细胞具有贴壁生长、增殖活性强、干细胞表型以及多向分化等特征.hADSCs体外成骨过程中,三酰甘油的形成对成骨具有一定的促进作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许辉	江苏大学附属医院皮肤科	42	109	5.0	8.0
2	李遇梅	江苏大学附属医院皮肤科	54	129	5.0	8.0
3	马红	江苏大学附属医院皮肤科	23	83	5.0	8.0
4	闵敏	江苏大学附属医院皮肤科	5	14	2.0	3.0
5	张雪静	镇江市第二人民医院皮肤科	2	11	1.0	2.0