重组人白介素21的原核表达与体外活性研究的优化

• 作者: 厉道娟 吴沁航 张娟 王彤 王旻 罗晨 高美风
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人白介素21 Overlap-PCR 原核表达 亲和层析 复性 细胞增殖抑制
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 283-287
• 页数: 5页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文

摘要

为了构建重组人白介素21(rhIL-21)原核稳定表达和体外活性检测系统,采用Overlap-PCR法合成目的基因;经双酶切整合至pET28,化学转化法转入大肠杆菌BL21(DE3)构建pET-28a-rhIL-21 BL21 (DE3)原核表达系统;胞内表达的包涵体经镍亲和层析色谱柱纯化后,尿素缓冲液梯度透析复性,最终溶于PBS缓冲液;双抗体夹心法ELISA、Western blotting检测复性蛋白的生物活性;细胞增殖抑制试验(MTT法)研究rhIL-21对Jurkat细胞株和HuT102细胞株的作用.实验成功建立了rhIL-21表达纯化与活性评价体系,为进一步研究IL-21的促免疫性疾病发展和抗肿瘤活性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王旻		170	1536	20.0	32.0
2	张娟		44	98	6.0	9.0
3	厉道娟		3	0	0.0	0.0
4	高美风		10	61	3.0	7.0
5	罗晨		8	8	2.0	2.0
6	王彤		6	3	1.0	1.0
7	吴沁航		3	10	1.0	3.0