Prohibitin启动子中胆固醇活性作用位点研究

• 作者: 刘卓炜 周芳坚 尧凯 李永红 秦自科 董培 蒋丽娟 郭胜杰 韩辉
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 胆固醇 抑制素 固醇调节元件
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1821-1825
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3483字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.10.017

摘要

目的:验证抑制素(prohibitin,PHB)基因启动子胆固醇敏感活性作用位点,为PHB在前列腺癌靶向基因治疗中的应用提供实验依据.方法:采用PCR分段扩增PHB启动子,克隆入pGL3-Basic萤光素酶报告基因载体.将构建的重组质粒用脂质体转染至人前列腺癌PC-3细胞,再分别培养于低胆固醇培养基和普通胆固醇培养基中,检测PHB启动子各分段重组质粒萤光素酶活性的变化.限定PHB启动子约200 bp的胆固醇敏感启动区域,找出其中的固醇调节元件(sterol regulatory element,SRE)同源位点并进行点突变,证实PHB基因的胆固醇敏感调控位点.结果:PHB启动子和各分段产物构建质粒完整.与转染完整PHB启动子(pPHB-1192)的PC-3细胞比较,转染pPHB-179(-35/+ 138)的PC-3细胞萤光素酶活性显著降低(P＜0.05).点突变位于PHB启动子上的-117到-108 bp的SRE可能位点后,与转染pPHB-1192的PC-3细胞比较,转染SRE点突变的PC-3细胞萤光素酶活性显著降低(P＜0.05).结论:PHB启动子在人前列腺癌PC-3细胞中的活性受胆固醇调节.PHB启动子中对胆固醇敏感的作用位点位于-117到-108 bp的SRE同源位点.PHB可能成为前列腺癌靶向基因治疗的有效工具.