抗胱抑素C鸡卵黄IgY抗体的制备及鉴定

• 作者: 傅龙章 叶启迪 李敏惠 李艳超 杨平 杨菌 潘克俭 邹珂珂 马玲玲 黄杰
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: IgY 抗体 胱抑素 C 鸡卵黄
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页码范围: 222-224
• 分类号: R392.1
• 字数: 1969字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.02.018

摘要

目的:制备高效价、高特异性的抗人胱抑素 C 鸡卵黄 IgY 抗体,并对其基本特性进行分析和鉴定.方法:以人胱抑素 C 为抗免疫产蛋的罗曼鸡,采用水稀释-盐析法提取及纯化 IgY 抗体,采用蛋白质定量、SDS-PAGE、West?ern 印迹和 ELISA 法对 IgY 抗体进行分析和鉴定.结果:免疫后14 d 即可从鸡冠血中检测出抗胱抑素 C 的特异性抗体,抗体效价在28 d 达最高峰(1∶32000),并可维持2个月以上;收集高效价时的免疫鸡蛋,制备鸡卵黄抗体 IgY;还性 SDS-PAGE 显示抗体 IgY 为相对分子质量分别为65×103和21×103的2条带,抗体纯度可达92%,得率为每个鸡蛋36.5 mg,抗体检出敏感度为15.63 ng/mL;Western 印迹证明该抗体具有高度特异性.结论:制备了抗胱抑素 C 的高效价、高特异性 IgY 抗体.