药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸的酶法合成

• 作者: 冯斌 徐洁 曹瀛 赵春晖
• 来源期刊: 大连医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: S-苯基-L-半胱氨酸 酶法合成 O-乙酰丝氨酸(硫醇)裂解酶 非蛋白质氨基酸
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 18-22
• 页数: 5页
• 分类号: Q599
• 字数: 3732字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11724/jdmu.2013.01.04

摘要

目的 利用在大肠杆菌中高效重组表达的O-乙酰丝氨酸(硫醇)裂解酶A(OASS-A)合成药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸,并对合成产物进行纯度及结构鉴定.方法 通过PCR扩增目的基因Cys K,并连接到pET-22b(+)载体上构建原核表达质粒,重组体转到感受态大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达,重组蛋白采用Ni2-树脂柱亲和层析纯化,利用SDS-PAGE鉴定表达纯化蛋白,通过HPLC对合成产物纯度进行检测,应用1H NMR技术对化合物进行结构鉴定.结果 成功构建了OASS-A原核表达载体,在IPTG诱导下获得了高效表达.重组酶高效合成非蛋白质氨基酸S-苯基-L-半胱氨酸.合成的化合物以晶体形式析出,采用HPLC和1HNMR技术对其结构进行了鉴定,合成产物的纯度为100％.结论 利用大肠杆菌中重组表达的OASS-A能够高效合成药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵春晖	辽宁师范大学生命科学学院	36	132	7.0	10.0
2	徐洁	辽宁师范大学生命科学学院	4	3	1.0	1.0
3	冯斌	大连医科大学生物技术系	5	5	1.0	2.0
4	曹瀛	辽宁师范大学生命科学学院	3	4	1.0	2.0