超声波处理花粉介导‘黄花’梨遗传转化体系的建立

• 作者: 吴俊 孙毅 宋跃 崔贵梅 张绍铃 马倩倩
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: ‘黄花’梨 花粉介导 超声波处理 转化体系 GFP基因
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 种质资源·遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 537-542,封2
• 页数: 7页
• 分类号: S661.2
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立超声波处理‘黄花’梨花粉介导插入外源基因的技术体系.[方法]以‘黄花’梨花粉为试材,检测不同蔗糖溶液中梨花粉破损率；通过中心组合设计方法,对超声波处理功率、处理时间、间隙时间、处理次数4个因子进行优化；利用含荧光蛋白基因的表达载体pCAMBIA 1304检测转化效率.[结果]梨花粉的适宜等渗溶液为15g·L-1蔗糖溶液.超声波处理的梨花粉受体最佳参数为:超声波处理功率160～170 W,处理时间6～7 s,间隙时间7s,处理次数7次.采用加入含GFP(green fluorescent protein)基因的pCAMBIA 1304表达载体质粒检测优化的超声波处理组合,梨花粉外源基因的插入效率为3％.[结论]研究确定了超声波处理‘黄花’梨花粉遗传转化体系.