迷迭香酸对氯化镉致斑马鱼胚胎发育毒性的保护作用

• 作者: 司婧 周鑫 姚雯 孙培环 张红 王振华 甘露 贺靖 鲁疆
• 来源期刊: 生物物理学报
• 学科: 医学
• 关键词: 氯化镉 迷迭香酸 氧化胁迫 发育毒理学 斑马鱼
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 338-350
• 页数: 13页
• 分类号: R151
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1260.2013.30047

摘要

通过考察氯化镉(CdCl2)对斑马鱼胚胎发育的毒性效应及迷迭香酸(rosmarinic acid,RA)的干预作用,探讨镉的发育毒性机理.将受精1h后的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的CdCl2或含不同浓度RA的CdCl2溶液中,观察胚胎死亡、孵化及幼鱼畸形的情况.采用吖啶橙染色,定性观察胚胎细胞凋亡情况；以单细胞凝胶电泳法检测胚胎细胞的DNA损伤；以活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光探针DCFH-DA染色法检测胚胎的ROS水平,硫代巴比土酸比色法测定胚胎脂质过氧化水平,5,5-二硫二硝基苯甲酸比色法测定胚胎的还原谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平；光泽精化学发光法检测胚胎还原型辅酶(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)Ⅱ氧化酶(NADPH oxidase,Nox)活性.结果显示,RA浓度依赖性地抑制了CdCl2诱导的胚胎死亡和幼鱼畸型,同时提高了胚胎孵化率.RA可浓度依赖性地改善CdCl2诱导的胚胎ROS和MDA (malonic dialdehyde)水平升高、GSH/GSSG比值降低和Nox活性升高,抑制CdCl2诱导的胚胎细胞凋亡.RT-PCR结果显示,RA对CdCl2诱导的胚胎Cu/Zn-Sod基因表达上调和Bcl-2/Bax水平下调也有明显改善作用.结果说明,CdCl2对斑马鱼胚胎发育具有毒性,可活化Nox,促进ROS生成,造成胚胎细胞氧化胁迫损伤以至胚胎细胞凋亡,而RA可抑制Nox活化,改善氧化胁迫状态,从而对CdCl2的发育毒性起保护作用.