人外周血淋巴细胞高分辨染色体制备技术的研究

• 作者: 叶嘉玲 周冰燚 张清健 徐珊珊 方俊宇 朱志勇 杨卫 王柏贤 田佩玲 蔡慧娜 郑立新
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: 高分辨染色体 G显带 秋水仙胺 分裂指数
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 53-56
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2|Q343
• 字数: 3735字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2013.01.012

摘要

目的:建立一种具有分裂指数高和染色体分散好等优点的550～850条带纹高分辨染色体的制备方法.方法:取10例健康人外周血为样本制备淋巴细胞高分辨染色体.固定5-氟尿嘧啶核苷、尿嘧啶核苷、胸腺嘧啶核苷、溴化乙锭、秋水仙胺的剂量,进行5个因素3个水平的正交设计15种实验方案.5个因素分别为培养时间、胸腺嘧啶核苷、溴化乙锭、秋水仙胺作用时间以及低渗时间.3个水平分别为培养时间64、72、80 h；胸腺嘧啶核苷作用时间16、17、18 h；溴化乙锭作用时间3、4、5h;秋水仙胺作用时间10、15、20 min以及低渗时间30、40、50 min.每例样本同时采用15种方案进行实验,比较各方案带纹在550条以上时染色体分裂指数和分裂相分散的情况.结果:在15种方案中培养时间以及秋水仙胺作用时间对分裂指数有显著影响(P＜0.01),其中培养72 h后加5-氟尿嘧啶核苷和尿嘧啶核苷进行同步化和秋水仙胺作用15 min高分辨染色体分裂指数最大.37℃低渗40 min高分辨染色体分散效果最佳.结论:本实验方案的高分辨染色体制备方法,具有分裂指数高和染色体分散好等优点,具有较好的推广价值.