利用RT-LAMP可视化检测技术检测H1亚型禽流感病毒及N1、N2亚型的分型

• 作者: 刘加波 周辰瑜 庞耀珊 彭宜 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 郭捷
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 逆转录环介导等温扩增 可视化检测 H1、N1、N2亚型禽流感病毒
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 154-161
• 页数: 8页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

为直接根据颜色变化进行可视化检测H1亚型、N1亚型、N2亚型禽流感病毒(AIV),根据环介导等温扩增技术(LAMP),建立针对H1亚型AIV及特异性鉴定N1、N2亚型的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法.根据GenBank中的AIV基因序列,设计了三套分别针对H1亚型AIV-HA基因及N1、N2亚型AIV-NA基因的特异性简并引物,并优化反应条件和体系.结果表明建立的检测方法对其它亚型AIV及禽呼吸道病原体无交叉扩增反应并能特异性地检测N1、N2亚型AIV,灵敏度优于传统的RT-PCR方法.整个反应在常规水浴中50min就可完成,反应结束后不需打开反应管盖,可根据反应液的颜色变化对结果直接进行判定.120份临床样品用建立的RT-LAMP方法检测到14份H1N1亚型AIV、8份H1N2亚型AIV,结果与病毒分离结果相符.本研究建立的三种RT-LAMP可视化检测技术特异、灵敏、快速、操作和结果判定简便,适合在基层进行H1亚型AIV的快速检测及N1、N2亚型AIV的分型.