三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)Perlucin蛋白原核表达条件的优化及表达产物的鉴定

• 作者: 李家乐 林静云 白志毅
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 三角帆蚌 Perlucin 原核表达 Western blot分析
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 114-118
• 语种: 中文

摘要

采用PCR方法从三角帆蚌外套膜cDNA中扩增perlucin基因的开放阅读框,连接到pET-28a表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组融合蛋白pET-28a-Hcperlucin.通过优化培养温度、IPTG浓度以及诱导时间,得出重组融合蛋白的最佳表达条件分别为:37℃、0.1 mmol/L IPTG、6h.重组融合蛋白主要以包涵体形式存在.SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,表达重组融合蛋白的相对分子量与预测值相符,约为21 kD,并能与鼠抗His-tag单克隆抗体进行特异性结合,表明重组融合蛋白构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李家乐	上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水水产种质资源重点实验室	91	1011	19.0	27.0
2	白志毅	上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水水产种质资源重点实验室	36	253	9.0	14.0
3	林静云	上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水水产种质资源重点实验室	1	6	1.0	1.0