蓝莓SRAP—PCR反应体系的建立优化及引物筛选

• 作者: 侯智霞 刘肖 尹德洁 苏淑钗 陈露
• 来源期刊: 东北林业大学学报
• 关键词: 蓝莓 分子标记 SRAP-PCR 体系优化 引物筛选
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页码范围: 35-39,64
• 页数: 6页
• 分类号: S663.9
• 语种: 中文

摘要

为进一步利用分子标记技术进行蓝莓品种鉴定及种质资源遗传多样性的分析,拟建立蓝莓新型SRAP标记(相关序列扩增多态性)的优化PCR体系并进行引物组合的筛选.运用改良CTAB法所提取的蓝莓幼嫩叶片的DNA,采用单因子试验,分析了模板DNA浓度、引物浓度、退火温度等影响SRAP-PCR的主要参数,建立了适合蓝莓SRAP-PCR的优化体系,20 μL的PCR反应体系:模板DNA浓度120 ng、引物浓度0.40μmoL/L、2×TaqPCR Master Mix 10 μL,剩余体积用去离子水补足；最佳PCR扩增程序的退火温度为50℃.并从80对SRAP引物组合中筛选出条带清晰且多态性丰富的15对引物组合.