TaqMan探针实时荧光定量反转录-聚合酶链反应检测新布尼亚病毒L基因方法的建立与应用

• 作者: 任宜 毛彬 王忠发 虞吉寅
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: real-time RT-PCR 新布尼亚病毒 核酸检测
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 自然疫源性疾病监测
• 页码范围: 132-135
• 分类号: R510
• 语种: 中文

摘要

目的 建立敏感、特异、实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,rRT-PCR)方法,用于新布尼亚病毒的核酸检测.方法 以新布尼亚病毒L基因为靶基因设计引物以及TaqMan探针,建立real-time RT-PCR方法,并对舟山市岱山县50份临床疑似患者血清、血浆、25份正常人群血清和从患者血清中分离到的2株病毒样本进行了检测鉴定,并验证了方法的特异性、敏感性和重复性.结果 建立的real-time RT-PCR具有良好的特异性,标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(R2 =0.999),最低检出浓度为1拷贝/μl,重复性评估批内变异系数均＜1.0％.在103份检测标本中,50份临床病例血清血浆标本,30份为阳性,健康人群血清25份和28份鼠肺、鼠肾均为阴性,8份病毒分离培养血样中2份为阳性.结论 本研究建立的real-time RT-PCR方法具有较高的特异性、敏感性和重复性,可用于人与动物新布尼亚病毒核酸的快速检测、病毒分离培养的初步鉴定等.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王忠发		13	71	5.0	8.0
2	虞吉寅		2	9	1.0	2.0
3	任宜		4	28	3.0	4.0
4	毛彬		2	13	2.0	2.0