蛇床子素对新生大鼠成骨细胞增殖的影响及相关机制研究

• 作者: 丁道芳 李玲慧 杜国庆 王辉昊 詹红生 龚浩
• 来源期刊: 中国骨伤
• 关键词: 蛇床子 成骨细胞 大鼠 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 419-422
• 页数: 4页
• 字数: 3474字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0034.2013.05.017

摘要

目的:探讨蛇床子素对体外培养的大鼠成骨细胞增殖的影响及机制.方法:新生SD大鼠10只,脱颈处死后取出颅盖骨,剪成约1 mm×1 mm的碎片,采用胰酶预消化15 min,继以0.1％Ⅰ型胶原酶37℃消化2次,每次1h,所得细胞混匀后置于5％ CO2培养箱中37℃恒温培养.细胞培养48 h、28 d后行ALP染色和矿化结节染色以进行成骨性鉴定.细胞随机分为5组,分别加入终浓度为100、50、25、12.5、0μmol/L的蛇床子素进行干预.24、48、72 h后采用CCK-8法检测细胞增殖率,并通过Western Blot方法检测加药1周后PCNA、β-catenin蛋白表达量.结果:镜下观察细胞形态不规则,具有典型的成骨细胞形态；ALP染色及矿化结节染色均为阳性.CCK-8检测发现100 μmol/L的蛇床子素干预24 h后即可抑制成骨细胞生长,50 μmol/L和25μmol/L的蛇床子素于加药后48 h开始抑制成骨细胞生长,12.5 μmol/L蛇床子素对成骨细胞的增殖无显著影响.Western Blot检测结果显示PCNA及β-catenin随蛇床子素浓度增加而表达下调.结论:100、50、25 μmoL/L各个浓度的蛇床子素可抑制成骨细胞增殖,12.5μmol/L蛇床子素对细胞的增殖特性无显著影响.蛇床子素抑制成骨细胞增殖的作用可能是通过干扰Wnt/β-catenin信号通路而实现的.