应用hiTAIL-PCR技术克隆Marinomonas sp.BSi20584菌株β-半乳糖苷酶基因

• 作者: 周莉莉 曾胤新 陈波 陈瑞琴 陈秀兰
• 来源期刊: 极地研究
• 关键词: β-半乳糖苷酶 高效热不对称交错PCR 染色体步移
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 249-256
• 页数: 8页
• 字数: 4054字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1084.2013.00249

摘要

实验使用hiTAIL-PCR(high-efficiency thermal asymmetric interlaced PCR,高效热不对称交错PCR)方法,从海单胞菌Marinomonas sp.BSi20584中克隆β-半乳糖苷酶基因.从GenBank注册的已知β-半乳糖苷酶氨基酸序列出发,设计引物克隆编码β-半乳糖苷酶保守片段的DAN序列；根据Marinomonas sp.BSi20584天然酶N端氨基酸残基测序结果,设计上游引物,保守DNA片段5'端设计下游引物,克隆N端到保守序列之间的DNA片段；将所得的2个DNA片段拼接并命名拼接后的片段为nbs.根据hiTAIL-PCR方法设计引物,染色体步移克隆nbs上下游片段,拼接上下游片段得到全长序列,设计引物扩增全长片段并测序.本文成功克隆了Marinomonas sp.BSi20584菌株β-半乳糖苷酶的编码基因,全长1971 bp,NCBI比对表明其编码产物为GH-42家族的一个新成员.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈秀兰	山东大学微生物技术国家重点实验室	34	944	16.0	30.0
2	曾胤新	国家海洋局极地科学重点实验室中国极地研究中心	5	79	3.0	5.0
3	周莉莉	华东理工大学生物工程学院	1	7	1.0	1.0
7	陈瑞琴	华东理工大学生物工程学院	1	7	1.0	1.0