重组免疫毒素GnRH-PTD-PE39KDEL的构建及表达

• 作者: 张广志 扈进冬 李纪顺 杨合同 魏艳丽
• 来源期刊: 山东科学
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白质转导域 人促黄体激素释放激素 绿脓杆菌外毒素A衍生物 免疫毒素
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 5-10,14
• 页数: 7页
• 分类号: Q78|R73
• 字数: 4258字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3976/j.issn.1002-4026.2013.03.002

摘要

通过引入蛋白质转导域(PTD),提高免疫毒素人促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A衍生物(GnRH-PE39KDEL)对肿瘤细胞的杀伤活性.设计了3条引物,通过2轮PCR在GnRH-PE39KDEL基因的人促黄体激素释放激素C端和绿脓杆菌外毒素A衍生物N端引入PTD,获得GnRH-PTD-PE39KDEL基因经酶切后插入pET-His载体,并转化至BL21(DE3)中.采用镍离子螯合层析法纯化诱导表达样品,并进行了生物活性测定.成功构建了免疫毒素表达载体pET-His-GnRH-PTD-PE39KDEL;诱导产物可以实现可溶性表达；表达产物占菌体总蛋白的20％,靶向融合蛋白引入PTD后对人乳腺癌MCF-7细胞的IC50为0.860μg/mL,表明较GnRH-PE39KDEL生物活性增强.成功地表达了融合蛋白GnRH-PTD-PE39KDEL,为其进一步大规模表达、纯化和功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李纪顺	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	78	575	14.0	21.0
2	杨合同	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	115	1327	21.0	31.0
6	张广志	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	22	202	8.0	13.0
7	扈进冬	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	34	187	8.0	12.0
8	魏艳丽	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	37	237	9.0	14.0