杂色鲍紫色酸性磷酸酯酶基因克隆及应激下的表达

• 作者: 张子平 王国栋 王淑红 王艺磊 蔡秀红 邹志华 黄贻涛
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 杂色鲍 紫色酸性磷酸酯酶 高温 缺氧 副溶血弧菌
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 939-949
• 页数: 11页
• 分类号: S917
• 字数: 6651字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2013.00939

摘要

利用本实验室获得的杂色鲍(Haliotis diversicolor)转录组测序数据库,筛选出杂色鲍紫色酸性磷酸酯酶(Purple acid phosphatase, PAP)同源片段,进而克隆获得PAP的cDNA全序列,命名为HdPAP,并进行了HdPAP蛋白的结构分析和功能预测,同时利用实时定量 PCR(qRT-PCR)技术分析 HdPAP 基因的组织表达谱和应激条件下的HdPAP表达变化。HdPAP基因cDNA全长1215 bp,含有1个编码322个氨基酸的969 bp的开放阅读框。经Blast比对,与无脊椎动物半索动物门囊舌虫(Saccoglossus kowalevskii)的PAP氨基酸序列一致性最高,达59%。通过实时定量PCR检测, HdPAP在检测的杂色鲍各组织中均有表达,其中在血细胞和肝胰腺的表达量显著高于其他各组织(P<0.05)。高温应激下,在检测的6个时相中, HdPAP在血细胞、肝胰腺和鳃中均出现不同程度的表达抑制。缺氧应激后,4 h血细胞中HdPAP显著低于对照组,24 h恢复到正常水平,96 h显著高于对照组(P<0.05),到192 h又恢复到正常水平。副溶血弧菌感染实验中检测到HdPAP在血细胞中同样出现表达抑制现象,3 h和6 h均检测到感染组 HdPAP表达量显著低于对照组(P<0.05)。PAP在高温、缺氧及弧菌感染下显著的表达抑制从转录水平揭示了其作为表达下调的酯酶可能参与胁迫下的生物代谢和免疫反应。