T7噬菌体表达载体的组氨酸改造及应用

• 作者: 张旭朏 樊江平 王志强 董晓民 钟理
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: His标签 T7噬菌体 cDNA文库 ORF
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 179-183
• 语种: 中文

摘要

利用基因重组技术,对已有载体T7Select 10-3b进行改造,得到被组氨酸标签标记(His-Tag)的新型表达载体,并 利用该载体构建cDNA文库,为后期开放阅读框的筛选提供更为简便有效的方法.以T7Select10-3b载体为出发材料,将复性得到组氨酸标签表达序列插入其多克隆位点处.再利用包装蛋白包装重组DNA,得到有侵染活性的重组T7噬菌体.用该载体构建乳腺癌cDNA文库,过镍柱,筛选开放阅读框(open reading frame,ORF),计算ORF重组率.测序结果显示该标签已经成功插入,化学发光免疫检测显示该标签在T7中表达.重组T7噬菌体文库的ORF筛选率由筛选前的5.6％提高到82％.T7噬菌体中插入的His标签对提高cDNA文库中ORF的重组率具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志强		25	120	6.0	9.0
2	张旭朏	河北大学生命科学学院	4	11	2.0	3.0
3	董晓民	河北大学生命科学学院	4	14	2.0	3.0
4	樊江平	河北大学生命科学学院	4	14	2.0	3.0