摘要:
目的 观察促进或抑制血红素加氧酶1(HO-1)基因表达对腹内高压(IAH)致肠黏膜损伤的影响. 方法 (1)促进或抑制HO-1基因表达大鼠模型的建立.选取24只健康成年Wistar大鼠,采用随机数字表法分为HO-1特异性诱导剂钴原卟啉(Co-PP) 2.5 mg组、Co-PP 5.0 mg组、HO-1特异性抑制剂锡原卟啉(Sn-PP)2.5 mg组、对照组,每组6只.Co-PP 2.5 mg组、Sn-PP 2.5 mg组大鼠分别腹腔注射Co-PP 2.5 mg/kg、Sn-PP 2.5 mg/kg,每12小时1次,共持续3d;Co-PP 5.0 mg组大鼠腹腔注射Co-PP 5.0 mg/kg,每24小时1次,共持续3d;对照组大鼠同前2组注射等量生理盐水.于注射后第4天处死大鼠,取肠黏膜组织检测HO-1 mRNA表达.选取Co-PP最佳剂量用于后续实验.(2)IAH条件下促进或抑制HO-1基因表达对肠黏膜损伤的影响.另取24只健康成年Wistar大鼠,按随机数字表法分为对照组、IAH组、Co-PP+ IAH组、Sn-PP+ IAH组,每组6只.Co-PP+ IAH组、Sn-PP+ IAH组大鼠分别以最佳剂量Co-PP、Sn-PP 2.5 mg/kg同前行腹腔注射;对照组同法注射等量生理盐水.注射后第4天,后2组大鼠腹腔充入氮气至腹内压达20 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),持续作用2h.IAH组大鼠同前制作IAH模型.对照组仅行腹腔穿刺置管,不充入氮气.剖腹取空肠段10 ~ 15 cm,刮取肠黏膜组织检测HO-1 mRNA表达以及二胺氧化酶(DAO)含量;抽取门静脉血检测D乳酸盐、TNF-α和IL-6含量;取空肠段1~2 cm行组织病理学观察.对数据进行单因素方差分析及t检验. 结果 (1)Co-PP2.5 mg组大鼠的HO-1 mRNA表达水平明显高于对照组及Co-PP5.0 mg组(t值分别为4.756、3.175,P<0.05或P<0.01).Sn-PP 2.5 mg组大鼠的HO-1 mRNA表达水平明显低于对照组(t =4.880,P<0.01).选择2.5 mg/kg Co-PP用于后续实验.(2)Co-PP+IAH组大鼠HO-1 mRNA表达水平为60±5,明显高于IAH组(49±5,t=3.811,P<0.01)和对照组(39±4,t=8.034,P<0.001).IAH组HO-1 mRNA表达水平高于对照组(t=3.826,P<0.01).Sn-PP+ IAH组HO-1 mRNA的表达水平为29 ±4,明显低于对照组(t=4.330,P<0.01).Co-PP+IAH组DAO、D乳酸盐含量分别为(0.52±0.05) U/mL、(1.9±0.6)mg/L,显著低于IAH组[(0.88±0.06) U/mL、(4.3±0.7) mg/L,t值分别为11.291、6.376,P值均小于0.01];但仍然高于对照组[(0.34±0.04) U/mL、(1.2±0.5) mg/L,t值分别为6.886、2.295,P<0.05或P<0.01].Co-PP+IAH组大鼠TNF-α及IL-6分泌水平显著低于IAH组,但仍高于对照组(t值为3.781 ~18.557,P值均小于0.01).Sn-PP+ IAH组的DAO、D乳酸盐含量和TNF-α及IL-6的分泌水平均高于其他各组(t值为4.181~ 32.938,P值均小于0.01).对照组肠黏膜上皮细胞结构完整,排列整齐.IAH组大鼠肠黏膜组织水肿,肠绒毛顶端糜烂、坏死.Co-PP+ IAH组大鼠肠绒毛损伤减轻.Sn-PP+ IAH组大鼠肠绒毛的损伤加重. 结论 诱导肠道HO-1基因高表达,可减轻IAH导致的肠道缺血缺氧性损伤,对肠黏膜具有一定的保护作用.