Taqman-MGB探针荧光定量PCR方法检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒的研究

• 作者: 徐丽美 李福英
• 来源期刊: 应用海洋学学报
• 学科: 地球科学
• 关键词: 海洋生物学 传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV) 荧光定量PCR Taqman-MGB探针
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 133-137
• 页数: 5页
• 分类号: P735
• 字数: 3182字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.2095-4972.2013.01.018

摘要

本文根据GenBank中对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)基因组上的保守序列,采用Taqman-MGB荧光定量PCR方法,设计了一组特异性引物和探针.利用阳性标准模板进行了定量PCR条件的优化研究.结果显示,在101～108拷贝范围内标准曲线的线性关系为R=0.999 4,检测灵敏度达到10拷贝,重复检测的变异系数均小于2％.利用上述建立的方法和条件,测定39份不同来源的对虾样品中IHHNV,检出率为49％.因此所建立的荧光定量PCR具有较高的灵敏度、特异性和重复性,可作为IHHNV快速的定量检测方法.