弓形虫ESA诱导小鼠产生的CD8+T细胞对早期黑色素瘤生长的影响

• 作者: 夏惠 方强 沈继龙 焦玉萌 王雪梅 陈兴智 陶志勇
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 刚地弓形虫 排泄分泌抗原 CD8+T细胞 黑色素瘤
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 95-98
• 分类号: R382.5
• 语种: 中文

摘要

目的 观察弓形虫排泄分泌抗原(TgESA)对B16F10黑色素瘤接种小鼠CD8+T细胞的影响,以及CD8+T细胞对B16F10黑色素瘤的作用.方法 取RH株弓形虫速殖子体外培养12h后,收集培养液,离心取上清,获得弓形虫ESA.15只C57BL/6小鼠随机分为A、B和C 三组(每组5只).B组和C组每鼠右腋窝皮下接种B16F10黑色素瘤细胞2×105个,A组注射等量无菌PBS.接种后第7天,C组每只小鼠腹腔注射TgESA 100μl.接种后第13天,处死小鼠,无菌取脾.流式细胞仪检测各组小鼠CD3+CD8+T细胞所占脾细胞比例;采用免疫磁珠分选B组和C组脾细胞中的CD8+T细胞,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测两组CD8+T细胞对B16F10细胞的杀伤作用,分别设效靶细胞比为2.5∶1、5∶1和10∶1.另取30只C57BL/6小鼠随机分为E、F和G三组(每组10只),每鼠接种B16F10细胞2×105个.接种同时,F组和G组小鼠分别尾静脉注射分离自B组和C组的CD8+T细胞(2×105个/鼠).观察小鼠瘤体生长情况,记录各组小鼠死亡数和死亡时间,共观察35 d.结果 流式细胞仪检测结果显示,A、B和C组脾脏CD3+CD8+T细胞占脾细胞的比例分别为(13.86±0.13)％、(14.18±0.27)％和(15.74±0.28)％,C组显著高于其他两组(P＜0.05).LDH释放试验结果显示,不同效靶细胞比时,C组的CD8+T细胞杀伤活性均显著高于B组(均P＜0.05).G组的平均出瘤时间[(14.9±1.2)d]晚于F组[(11.9±0.7)d]和E组[(9.4±1.2)d] (P＜0.05).3组小鼠自出瘤后瘤体均不断增长,但增长速度无明显差异,G组的瘤体面积始终小于其他两组(均P＜0.05).E、F和G组小鼠分别于B16F10细胞接种后第26、29和30天开始出现死亡,至观察终点(第35天),3组小鼠存活的数量分别为3、5和7只.结论 TgESA可上调B16F10黑色素瘤小鼠CD8+T细胞的数量和杀伤功能,上调的CD8+T细胞具有早期延缓肿瘤生长的作用.