脂肪间充质干细胞对烧伤脓毒症小鼠肾脏损伤的作用

• 作者: 张月 李娜 李小强 王耀军 白晓智 石继红 胡大海 胡晓龙 蔡维霞
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 关键词: 烧伤 间质干细胞 肾 脓毒症
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 脏器并发症
• 页码范围: 249-254
• 页数: 6页
• 字数: 5267字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2013.03.007

摘要

目的 探讨脂肪间充质干细胞(ADSC)对烧伤脓毒症小鼠肾脏损伤的作用及相关机制. 方法 (1)取5只C57 BL/6J小鼠双侧腹股沟脂肪组织,采用酶消化法、密度梯度离心法及贴壁法分离培养纯化小鼠ADSC,取第3代细胞行形态学观察、测定细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞表面分子标记物,并行成骨及成脂肪细胞诱导分化鉴定.(2)另取37只C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为正常对照组、生理盐水组、ADSC组.正常对照组5只,其余2组各16只.生理盐水组及ADSC组小鼠造成背部15％ TBSAⅢ度烫伤后,创面中心注射铜绿假单胞菌菌液制成烧伤脓毒症小鼠模型,之后分别经尾静脉注射生理盐水和ADSC,均于伤后12、24、48、72 h观察肾脏组织病理学变化、检测血肌酐和尿素氮水平,并采用实时荧光定量PCR法检测肾脏组织TNF-α、IL-12、IL-10以及环氧合酶2(COX2) mRNA表达.正常对照组小鼠不行任何处理,但均行上述检测.对数据行多因素方差分析及LSD-t检验. 结果 (1)分离培养的细胞传至第3代时,形态均一与Fb相似,排列规则；CD90+、CD105+、CD34-、CD45-细胞百分比均在90％以上；细胞可向成脂和成骨细胞分化；经鉴定,细胞为ADSC.(2)伤后12～72 h,生理盐水组小鼠肾小管和肾小球中中性粒细胞浸润逐渐增多,管腔受损、肾小球结构被破坏.ADSC组小鼠伤后各时相点肾组织病理学损伤程度均轻于生理盐水组.生理盐水组各时相点血肌酐、尿素氮水平均明显高于正常对照组(P值均小于0.01)；伤后12～72 h,与生理盐水组比较,ADSC组血肌酐、尿素氮水平均明显下降(P值均小于0.01).与正常对照组比较,伤后24 h生理盐水组及ADSC组TNF-α、IL-12 mRNA表达量均升高(P值均小于0.05).伤后24 h,ADSC组TNF-α mRNA水平(1.58±0.19)明显低于生理盐水组的3.36±0.30(P＜0.05).伤后24 h,ADSC组IL-10、COX2 mRNA水平分别为2.89±0.47、4.90±0.59,均高于正常对照组的1.00±0.15、1.00±0.27和生理盐水组的1.32±0.38、1.57±0.38(P值均小于0.05). 结论 ADSC可降低血肌酐和尿素氮水平,促进抗炎因子IL-10、COX2生成,抑制促炎因子TNF-α、IL-12释放,对烧伤脓毒症小鼠肾脏损伤有保护作用.