牛传染性鼻气管炎病毒gD基因截短表达及其抗血清制备

• 作者: 何洪彬 候佩莉 宋玲玲 张辉 杨宏军 武建明 王洪梅 王立群
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛传染性鼻气管炎病毒 gD糖蛋白 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: S811.6
• 字数: 3986字
• 语种: 中文

摘要

gD糖蛋白是IBRV感染细胞的主要分子,在病毒吸附和侵入宿主细胞中发挥着重要作用.利用IBRV基因组DNA为模板,经生物学软件DNAstar分析主要抗原区,PCR扩增gD基因786 bp片段,定向连接到pET32a(+)表达载体中,筛选阳性克隆转化BL21(DE3)表达菌中,IPTG诱导表达部分可溶的重组蛋白.Ni-NTA非变性纯化系统纯化蛋白,纯化的蛋白免疫新西兰兔制备抗血清,利用间接ELISA法检测抗血清效价为1∶6400;同时以该血清进行血清中和病毒实验,中和指数为1∶640,显示该抗血清具有良好的抗病毒能力,为进一步开发牛传染性鼻气管炎(IBR)的诊断检测试剂和疫苗奠定了重要基础.