高表达受体活性修饰蛋白1对血管紧张素Ⅱ和降钙素基因相关肽诱导的A10细胞降钙素受体样受体膜分布的影响

• 作者: 唐江琼 孙飞 秦又发 秦旭平 郑元斌 陈临溪
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管紧张素Ⅱ 降钙素基因相关肽 降钙素受体样受体 受体活性修饰蛋白1
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 209-215
• 页数: 7页
• 分类号: R966
• 字数: 4778字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2013.02.015

摘要

目的 探索受体活性修饰蛋白1(RAMP1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和(或)降钙素基因相关肽(CGRP)诱导的降钙素受体样受体(CRLR)在血管平滑肌细胞(VSMC)的表达和分布的影响,进一步揭示CGRP抑制VSMC增殖的机制.方法 通过酶切、连接、转化等方法构建pCDNA3.1(+)-RAMP1真核表达载体并稳定转染至鼠源性血管平滑肌细胞株A10中,获得稳定高表达RAMP1的细胞系.无转染细胞、转染空载体[pCDNA3.1(+)]细胞和RAMP1高表达组细胞[pCDNA3.1(+)-RAMP1]分别用AngⅡ 100 nmol·L-1、CGRP 100 nmol·L-1和CGRP+AngⅡ处理24 h,用MTT法检测细胞存活;逆转录PCR、Western印迹和免疫荧光法分别检测CRLR mRNA含量、蛋白表达及细胞膜分布.结果 单纯转染空质粒或RAMP1对细胞增殖无明显影响.AngⅡ处理对3种细胞存活的影响无显著差异.pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞经CGRP处理24 h后,细胞存活明显高于其他两组细胞(P<0.05);经CGRP+AngⅡ处理,细胞存活明显低于其他两组(P<0.05).AngⅡ,CGRP和CGRP+AngⅡ处理对3种细胞CRLR mRNA表达无明显影响,但CGRP处理使pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞中CRLR蛋白明显高于其他两种细胞(P<0.05),而CGRP+AngⅡ处理使pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞中CRLR蛋白明显低于其他两种细胞(P<0.05).免疫荧光结果显示,经无血清或CGRP处理后,无转染细胞和pCDNA3.1(+)细胞中的RAMP1和CRLR主要分布在胞浆区域;经AngⅡ或CGPR+AngⅡ处理后,pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞中RAMP1和CRLR在细胞膜上的分布多于无转染细胞和pCDNA3.1(+)细胞.结论 高表达RAMP1能增强CGRP抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖,其机制可能是通过RAMP1增加CRLR的膜分布,从而增强CGRP受体对CGRP的敏感性有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐江琼	南华大学药物药理研究所	8	20	3.0	4.0
2	秦旭平	南华大学药物药理研究所	98	520	12.0	18.0
3	陈临溪	南华大学药物药理研究所	67	432	12.0	18.0
4	秦又发	南华大学药物药理研究所	4	4	1.0	2.0
5	孙飞	南华大学药物药理研究所	5	10	2.0	3.0
7	郑元斌	南华大学药物药理研究所	5	46	3.0	5.0