斑蝥素对草地贪夜蛾Sf9细胞膜完整性和膜电位的影响

• 作者: 张志勇 张来喜 张民照 张爱环 杨宝东 汪丽 王进忠
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 草地贪夜蛾 斑蝥素 Sf9细胞 膜完整性 膜电位 去极化
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 毒理与抗性
• 页码范围: 512-520
• 分类号: Q965.9
• 语种: 中文

摘要

为明确斑蝥素对昆虫细胞膜的作用及其机理,本研究利用草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的卵巢细胞系Sf9细胞作为实验材料,采用透射电子显微技术(transmission electron microscope,TEM)、激光共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)结合荧光探针FDA/PI及DiBAC4 (3)技术研究斑蝥素(cantharidin,CTD)对Sf9 细胞膜完整性及膜电位(membrane potential,MP)的影响.结果表明:32 μmol/L CTD处理6h和12 h后,电镜观察均未发现细胞膜结构破损；FDA/PI染色后,32 μmol/L CTD处理0.5h后细胞FDA荧光强度比对照显著降低(P＜0.05),碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色的细胞比例与对照无显著性差异(P≥0.05).32 μmol/L CTD处理140 s后即引起MP发生显著性去极化(P＜0.05)；64μmol/L CTD处理瞬时MP发生显著性去极化(P＜0.05)；32 μmol/LCTD处理3h内及64 μmol/L CTD处理2h内MP仍保持显著性去极化(P＜0.05),之后去极化程度降低；32 μmol/L CTD处理6h及64μmok/L CTD处理3h时MP去极化与对照组相比已无显著性差异(P≥0.05).结果说明,CTD处理短时间内可引起Sf9细胞膜电位去极化并维持一段时间,同时导致细胞活性发生不可逆下降,但未对细胞膜结构完整性产生破坏.