鸡Piwi蛋白的亚细胞定位研究

• 作者: 常国斌 张颖 戴爱琴 李建超 阴彦辉 陈国宏 陈蓉 马腾
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: Piwi蛋白 真核表达 亚细胞定位 绿色荧光蛋白 间接免疫荧光
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 15-22
• 页数: 8页
• 分类号: S831.2
• 字数: 5291字
• 语种: 中文

摘要

通过构建2种真核表达载体比较Piwi蛋白在真核细胞中的表达部位,为进一步研究Piwi蛋白的生物学功能提供依据.采用RT-PCR方法克隆了狼山鸡睾丸组织中Piwi基因CDS,构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的融合表达载体pEGFP-C1-Piwi,脂质体PEI介导基因转染NIH-3T3细胞,同时构建pcDNA3.1-Piwi真核表达载体,采用细胞间接免疫荧光方法检测Piwi蛋白在NIH-3T3细胞的表达部位.结果表明,成功克隆出公鸡Piwi基因的全序列CDS,大小为2604 bp,与GenBank中预计的序列基本一致；融合表达载体pEGFP-C1-Piwi在整个细胞中都有表达；而间接免疫荧光方法检测到pcDNA3.1-Piwi载体主要在NIH-3T3细胞质中表达.Piwi蛋白主要在细胞质中表达,采用间接免疫荧光方法比EGFP报告基因法更为可靠,适合目的蛋白的亚细胞定位研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈国宏	扬州大学动物科学与技术学院	393	3876	28.0	46.0
2	常国斌	扬州大学动物科学与技术学院	91	418	11.0	16.0
3	阴彦辉	扬州大学动物科学与技术学院	8	33	4.0	5.0
4	张颖	扬州大学动物科学与技术学院	26	104	6.0	8.0
5	陈蓉	扬州大学动物科学与技术学院	16	105	6.0	9.0
6	李建超	扬州大学动物科学与技术学院	2	8	1.0	2.0
7	戴爱琴	扬州大学动物科学与技术学院	3	20	3.0	3.0
8	马腾	扬州大学动物科学与技术学院	6	22	3.0	4.0