黄粉虫热休克蛋白70基因的克隆、序列分析与表达

• 作者: 孙灵 王勤 胡杰 黄琼
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 黄粉虫 热休克蛋白 基因克隆 生物信息学 mRNA表达 热激
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 475-485
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

为给黄粉虫Tenebrio molitor抗逆机理研究提供理论依据,本研究采用PCR和RACE法从黄粉虫幼虫中克隆出一个热休克蛋白70基因Tmhsp70,并运用半定量RT-PCR法检测其在黄粉虫不同发育阶段的mRNA表达水平.结果表明:克隆出的Tmhsp70序列全长2 282 bp,具有一个富含A的115 bp5′-非翻译区和一个1 935 bp的开放阅读框及一个富含A、T的232 bp 3′-非翻译区.5′-非翻译区含有7个热休克元件nGAAn,3′-非翻译区末端有长22bp的Poly (A)尾.Tmhsp70编码的黄粉虫热休克蛋白(TmHSP70)具有3个典型的HSP70特征基序(IDLGTTYS,IFDLGGGTFDVSIL和IVLVGGSTRIPKIQQ)和1个胞质HSP70末端特征基序(EEVD),无信号肽和跨膜区域,包含2个主要的结构域,即:N-端42 kDa的高度保守ATPase功能域和C-端18 kDa的保守多肽结合功能域.ATPase功能域的三级结构由2个大球形亚功能域组成,具有1个核苷酸结合中心；多肽结合功能域形成1个双层4股β-折叠片样的三明治结构和2个α-螺旋,内含1个多肽结合通道.此外,黄粉虫Tmhsp70 mRNA的表达具有热激诱导和发育调控的特征.半定量RT-PCR分析表明,42℃热激lh的黄粉虫各发育阶段Tmhsp70 mRNA的表达量上升了1.4 ～26.9倍.25℃下1日龄黄粉虫蛹中的Tmhsp70 mRNA表达量要高于其余各发育阶段的累积表达量；42℃热激lh后90日龄幼虫中的Tmhsp70 mRNA表达量最丰富,既高于30日龄和60日龄幼虫中的累积表达量,也高于15日龄和30日龄成虫中的累积表达量.这些结果为进一步研究黄粉虫热休克蛋白的结构、功能和表达调控及其与抗逆性的关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄琼	四川农业大学林学院森林保护学省级重点实验室	32	391	13.0	18.0
2	胡杰	四川农业大学经济管理学院	17	190	8.0	13.0
3	王勤	四川农业大学生命科学理学院生物系	17	144	5.0	12.0
4	孙灵	四川农业大学林学院森林保护学省级重点实验室	1	3	1.0	1.0