玻连蛋白对高糖培养的人脐静脉内皮细胞的作用

• 作者: 杨侠 王玉风 董晓光
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 玻连蛋白 高糖 细胞骨架 细胞迁移 人脐静脉内皮细胞
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 49-54
• 页数: 6页
• 字数: 6657字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2013.01.012

摘要

背景 玻连蛋白是一种多功能糖蛋白.本研究组前期的动物实验表明,玻连蛋白在缺氧小鼠视网膜中表达明显增高,体外细胞实验表明高糖可以诱导人脐静脉内皮细胞人(UVECs)中玻连蛋白表达的增加.但目前尚未证实玻连蛋白在视网膜新生血管病变中的作用机制. 目的 观察玻连蛋白对高糖培养下人UVECs的细胞骨架结构、细胞迁移、细胞成管能力的影响. 方法 建立高糖培养的人UVECs体外模型,利用干扰RNA技术干扰玻连蛋白的表达.实验分为高糖组(含50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养人UVECs)、阴性干扰组(对照用siRNA预干扰人UVECs后,再用含50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养)和阳性干扰组(玻连蛋白siRNA预干扰人UVECs后,再用含50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养),在各组中分别利用Western blot法检测玻连蛋白的表达量,免疫荧光细胞化学染色结合荧光显微镜观察人UVECs微丝骨架,划痕法观察人UVECs的迁移情况,Matrigel法检测人UVECs的成管能力.各组的总体差异比较采用单因素方差分析,组间的多重比较采用LSD-t检验. 结果 Western blot结果显示,0h时3个组间玻连蛋白表达量的差异无统计学意义(F=1.064,P＞0.05)；培养24 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中玻连蛋白的表达量依次降低,差异有统计学意义(F=15.519,P＜0.05)；培养48 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中玻连蛋白表达量也依次降低,3个组间的差异亦有统计学意义(F=37.521,P＜0.05).免疫荧光结果显示,24 h时高糖组中的细胞微丝骨架结构最明显,阴性干扰组次之,阳性干扰组最不明显；培养48 h细胞微丝骨架分布亦然.划痕实验表明,培养24 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中迁移入划痕区的细胞数量依次减少,3个组间的差异有统计学意义(F=90.685,P＜0.05)；培养48 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中迁移入划痕区的细胞数量也呈递减趋势,3个组间的差异有统计学意义(F=67.880,P＜0.05).Matrigel法证实培养6h高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中细胞形成的血管腔数目逐渐减少,3个组间的差异有统计学意义(F=86.653,P＜0.05)；培养12h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中细胞形成的血管腔数目也依次减少,3个组间的差异有统计学意义(F=18.992,P＜0.05). 结论 玻连蛋白可以引起高糖培养的人UVECs发生细胞骨架重塑、细胞迁移能力增加、细胞成管能力增强,可能是糖尿病视网膜病变(DR)新生血管形成的一个重要影响因素.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董晓光		49	211	8.0	12.0
2	杨侠		8	5	1.0	1.0
3	王玉风		1	1	1.0	1.0