小鼠睾丸体外培养模型研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对睾酮合成及机制的影响

• 作者: 徐华 朱彦锋 李云 李敏 高志斌 黄洁
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 器官培养 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 乳鼠 睾丸 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 511-516
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨睾丸体外培养模型下邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)暴露对小鼠睾丸睾酮合成及基因表达的影响.方法 用浸浴式一次性通气旋转装置体外培养小鼠睾丸组织.实验分为二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组和4个DEHP剂量染毒组(终浓度0.1、1.0、10.0、100.0μmol/L).分别培养24、48、72 h,每24 h通气一次.放射免疫法测定收集培养基中睾酮水平;Elisa法测定收集培养基中抑制素基因β_B基因(INHBβ)水平;实时荧光定量(QT)-PCR检测睾丸组织相关基因表达水平;HE染色观察睾丸组织病理学变化;免疫组化法检测睾丸组织相关蛋白表达.结果 与DMSO溶剂对照组相比,DEHP一定浓度范围内,可使睾酮合成增加,但在DEHP100.0μmol/L染毒48、72 h,睾酮合成开始减少.Elisa测定INHBβ在DEHP 0.1μmol/L、1.0 μmol/L染毒组合成增加,从DEHP 10.0 μmol/L开始合成减少.QT-PCR检测结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,3β羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、抗细胞色素P450 17α羟化酶(P450c17)、细胞色素P450侧链裂解酶(P450Scc)、波形蛋白(vimentin) mRNA表达下降,尤其是DEHP 100.0 μmol/L剂量组(P＜0.05),INHBβ mRNA表达无显著变化.HE染色,各组睾丸组织未观察到明显病理学改变.免疫组化检测结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,蛋白3β-HSD、P450c17、P450Scc表达增强,vimentin表达减弱,尤其是DEHP 10.0 μmol/L、100.0 μmol/L两个剂量染毒组.结论 DEHP暴露对体外培养睾丸的睾酮合成有影响,其机制可能由于其影响了相关功能基因表达,进而对睾酮合成产生正负调控两种作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李云	四川大学华西公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	60	341	12.0	16.0
2	李敏	四川大学华西公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	117	359	9.0	15.0
3	黄洁	四川大学华西公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	6	21	3.0	4.0
4	朱彦锋	四川大学华西公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	8	35	4.0	5.0
5	徐华	四川大学华西公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	5	25	3.0	5.0
6	高志斌	四川大学华西公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	4	11	3.0	3.0