摘要:
目的:探讨沉默同源盒基因A10(HOXA10)对白血病U937细胞化疗药物敏感性的影响.方法:选择白血病细胞株U937为实验细胞,应用慢病毒载体介导短发卡RNA(shRNA)靶向沉默HOXA10基因(KD组)、并设阴性对照(NC)组、空白对照(CON)组.用流式细胞仪测定慢病毒的感染效率,RT-PCR和蛋白质印迹法检测shRNA干扰后的HOXA10基因mRNA和蛋白表达水平;在阿糖胞苷和柔红霉素作用实验细胞后,用四甲基噻唑氮蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法和流式细胞仪分别检测实验细胞的增殖和凋亡水平.结果:慢病毒对U937细胞的感染率为90%;KD组HOXA10 mRNA表达水平为0.047 3±0.016 8,低于NC组0.225 2±0.059 5,P=0.004,同时低于CON组0.261 3±0.054 9,P=0.002;KD组HOXA10蛋白表达水平为0.001 5±0.000 8,低于NC组0.013 4±0.005 9,P=0.001,同时低于CON组0.014 5±0.001 6,P=0.001.KD组U937细胞的阿糖胞苷半数抑制浓度(IC50)为(12.80±4.32) μg/mL,显著低于NC组(116.65±16.66) μg/mL,P<0.001,同时低于CON组(100.14±15.45) μg/mL,P<0.001;KD组U937细胞柔红霉素IC50为(75.33±20.40)ng/mL,低于NC组(245.00±46.13) ng/mL,P=0.001,同时低于CON组(267.67±32.65) ng/mL,P<0.001.KD组阿糖胞苷诱导的细胞凋亡率为(71.37±3.24)%,高于NC组(45.27±1.88)%,P<0.001,同时高于CON组(39.39±4.46)%,P<0.001;KD组柔红霉素诱导的细胞凋亡率为(59.72±3.07)%,高于NC组(34.96±5.89)%,P=0.004,同时高于CON组(35.05±9.23)%,P=0.004.NC和CON组之间IC50和细胞凋亡率差异无统计学意义.结论:沉默HOXA10基因可增加U937细胞对化疗药物的敏感性.