人同源异形盒基因HOXB9多克隆抗体的制备和活性鉴定

• 作者: 唐岩 张宏权 战军 李枫 牛苗苗 马博
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: HOXB9 纯化蛋白 多克隆抗体 免疫印迹法 新西兰白兔
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 细胞和分子生物学
• 页码范围: 468-474
• 页数: 7页
• 分类号: R392.11
• 字数: 6548字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.005

摘要

目的 制备兔抗人同源异形盒基因HOXB9的多克隆抗体,为后续深入研究HOXB9蛋白的功能提供工具.方法 采用聚合酶链反应(PCR)和DNA重组技术,构建HOXB9基因5’端7458碱基片段到原核表达载体pGEX-4T-1和pMal-C2x中,热休克法转化及异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导表达谷胱甘肽转移酶标签的HOXB9 N端融合蛋白和麦芽糖结合蛋白标签的HOXB9 N端融合蛋白.纯化GST-HOXB9 N端融合蛋白免疫新西兰白兔,ELISA鉴定效价后,颈动脉放血,收集血清,纯化抗体.免疫印迹法及免疫沉淀法鉴定抗体有效性及特异性.结果 本实验制备的抗体能够特异识别目标分子的单一条带,并且具有较强的免疫沉淀天然构象的HOXB9蛋白的能力;采用所制备的抗体检测发现,HOXB9蛋白在小鼠免疫器官、胰脏、结肠、肺、小脑、雌性生殖系统及睾丸中表达较高,其他器官表达较低或无表达.结论 成功制备了特异而有效的兔抗人HOXB9蛋白多克隆抗体,此多克隆抗体可用于免疫印迹法分析及免疫沉淀实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐岩	北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	78	232	8.0	10.0
2	李枫	北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	33	165	6.0	12.0
3	战军	北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	19	32	3.0	5.0
4	张宏权	北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	17	53	4.0	7.0
5	马博	北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	7	47	4.0	6.0
6	牛苗苗	北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	4	19	2.0	4.0