基于Tet-On Advanced的肺癌细胞15-脂氧化酶-2基因表达载体的构建与表达

• 作者: 杨玉花 郑建全 魏晓莉
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 15-脂氧化酶-2 Tet-On Advanced系统 肺癌 A549细胞
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 45-48
• 分类号: Q78
• 字数: 3299字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.01.010

摘要

目的:构建肺癌细胞15-脂氧化酶-2(15-Lox-2)的可诱导性真核表达载体pTRE-Tight-15-Lox-2,并在肺癌细胞中检测其是否可受强力霉素(DOX)诱导表达.方法:pcDNA3-15-LOX-2载体经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切线性化,回收15-LOX-2 cDNA片段,将其克隆入pTRE-Tight载体的EcoRⅠ和XbaⅠ位点;采用脂质体法将pTet-On-Ad?vanced与构建的pTRE-Tight-15-Lox-2共转染肺腺癌A549细胞,DOX诱导表达后,Western印迹检测15-Lox-2的表达水平.结果:构建了pTRE-Tight-15-Lox-2诱导表达载体;Western印迹检测表明,该载体能在肺癌细胞内表达,且其表达受DOX调控.结论:Tet-On Advanced系统能严密高效地调控15-LOX-2在肺癌细胞中的表达,为进一步研究15-LOX-2在肺癌中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑建全	军事医学科学院毒物药物研究所	78	220	7.0	10.0
2	魏晓莉	军事医学科学院毒物药物研究所	32	147	7.0	11.0
3	杨玉花	军事医学科学院毒物药物研究所	9	142	4.0	9.0