摘要:
背景 增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是导致视网膜脱离复位手术失败的主要原因之一.PVR玻璃体蛋白质组学研究发现,胰岛素样生长因子结合蛋白-6(IGFBP-6)是PVR患者玻璃体和血清中的特异蛋白质,且其在严重PVR患者中的含量明显高于轻度PVR. 目的 探讨IGFBP-6在PVR大鼠模型中的表达变化. 方法 选取7周龄SPF级雄性Wistar大鼠70只,采用抛硬币法随机将动物分为PVR模型组34只和对照组36只.PVR模型组大鼠左眼玻璃体腔内注入透明质酸酶1U(商品单位),注射后10 min待玻璃体液化后,玻璃体腔内再注入1×106视网膜色素上皮(RPE)细胞悬液5μl和1×10 7富含血小板的血浆5μl;对照组大鼠以同样的方法注射无菌生理盐水10μl.各组大鼠玻璃体腔注射后1、2、3、4周行眼底检查并按Francine标准对PVR进行分级.分别于造模后1、2、4、8周处死各组大鼠,抽取动物心脏血,切取肝脏和视网膜,并制备切片,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝脏组织和视网膜组织中IGFBP-6 mRNA的表达,采用ELISA法检测大鼠玻璃体和血清中IGFBP-6的质量浓度,对各组大鼠的测量指标进行比较. 结果 利用实时荧光定量PCR法分别从肝脏和视网膜中提取高纯度的IGFBP-6 mRNA.PVR模型组大鼠造模后第4周视网膜中IGFBP-6 mRNA含量为(3.79±1.33) ×10-4,明显低于对照组的(8.32±2.96) ×10-4,差异有统计学意义(t=3.420,P<0.01);PVR模型组大鼠造模后第4周视网膜中IGFBP-6 mRNA含量明显低于造模后第1、2、8周,差异均有统计学意义(P<0.05),而PVR模型组大鼠造模后各时间点肝脏中IGFBP-6 mRNA含量与对照组比较以及PVR模型组大鼠组内各时间点间的比较差异均无统计学意义(P>0.05).PVR 1、2、3级组大鼠视网膜中IGFBP-6 mRNA含量明显低于对照组,差异有统计学意义(P>0.05),但不同等级的PVR大鼠间差异无统计学意义(P>0.05).ELISA检测结果显示PVR 1、2、3级组大鼠玻璃体中IGFBP-6的质量浓度分别为(221.00±19.32)、(229.63±18.89)和(225.70±26.71) μg/L,明显高于对照组的(173.25±21.11) μg/L,差异有统计学意义(P<0.05),但PVR组各级之间比较差异无统计学意义(t=1.240、1.46,P>0.05).PVR模型组大鼠和血清中IGFBP-6质量浓度高于对照组大鼠,4周时两组间差异有统计学意义(P<0.05). 结论 PVR大鼠玻璃体和血清中IGFBP-6质量浓度均增加,玻璃体中增加的IGFBP-6可能来源于局部的自分泌.