酸性神经磷脂酶在维生素E琥珀酸酯诱导胃癌细胞凋亡过程中对内质网应激的影响

• 作者: 吴坤 张旭光 王立明 董瑞华 赵巍
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: 酸性神经磷脂酶 维生素E琥珀酸酯 内质网应激 凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 327-332
• 页数: 6页
• 分类号: R735.2
• 字数: 4116字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2013.05.001

摘要

目的:探讨酸性神经磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASMase)在维生素E琥珀酸酯(vitaminE succinate,VES)诱导胃癌细胞凋亡过程中对内质网应激的影响.方法:常规体外培养人低分化胃癌SGC-7901细胞,将细胞分为ASMase抑制剂地昔帕明(desipramine,DES)处理组(12.5μmol/L DES作用2 h),对照组(含2％胎牛血清的RPMI-1640培养液),VES+DES组(用12.5μmol/LDES抑制ASMase活性2h后加20μg/mL VES)以及VES处理组(20μg/mL).以ASMase活性试剂盒检测0、1.5、3、6h时VES+DES组及VES处理组细胞中ASMase活性.MTT法分别检测12、24和48 h时各组细胞的增殖情况.再在处理细胞24 h后,采用倒置显微镜观察各组细胞形态;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞中内质网应激相关蛋白GRP78、GRP94、Perk、p-Perk、Chop和Caspase-4的表达.结果:VES (20μg/mL)处理能够诱导细胞中ASMase活性增加,在3 h时细胞中ASMase活性达到最高,随后逐渐降低;VES+DES组细胞中ASMase活性始终维持在较低的水平.与对照组相比,DES组在各项检测中均无明显变化,而VES组与VES+DES组在处理细胞12、24与48 h后,细胞的增殖受到明显抑制(P均＜0.05),并呈时间-效应趋势,且VES+DES组细胞不同时间点的相对增殖率均明显高于VES组(P均＜0.05);细胞形态学显示20μg/mL VES处理细胞后,镜下死细胞明显增多,而VES+DES组死亡细胞数量较VES组减少;流式细胞术检测凋亡率显示VES处理组为39.21％±1.90％,明显高于空白对照组(3.91％±1.68％)与DES组(4.07％±1.39％)(P均＜0.05),VES+DES组(19.47％±4.46％)较VES组明显降低(P＜0.05); Western blot结果显示VES+DES组细胞中内质网应激相关蛋白GRP78、GRP94、p-Perk、Chop以及c-Caspase-4表达水平较单纯VES处理组降低(P均＜0.05).结论:ASMase参与VES通过内质网应激诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的过程,起促进凋亡的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴坤	哈尔滨医科大学营养与食品卫生教研室	128	1260	19.0	28.0
2	赵巍		20	33	3.0	4.0
3	张旭光	哈尔滨医科大学营养与食品卫生教研室	6	17	2.0	3.0
4	王立明		6	12	2.0	3.0
5	董瑞华	哈尔滨医科大学营养与食品卫生教研室	1	2	1.0	1.0