离子交换介质内蛋白置换行为的观测与解析

• 作者: 史清洪 孙彦 石智聪
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 置换色谱 共聚焦激光扫描显微镜 绿色荧光蛋白 介质内传质 肌醇六磷酸钠
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 340-345
• 页数: 6页
• 分类号: TQ936.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0438-1157.2013.01.039

摘要

以肌醇六磷酸钠(PAS)为置换剂研究了绿色荧光蛋白(eGFP)在Q Sepharose HP离子交换色谱(IEC)介质上的置换行为.置换色谱结果表明,不同浓度PAS下eGFP均可形成稳定的置换列并成功分离.利用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)技术对eGFP在离子交换色谱介质内吸附动力学的观测发现,eGFP在IEC介质内的吸附是由表面扩散和孔扩散共同作用的复杂行为.置换过程中不同时刻的CLSM图像显示,eGFP置换不仅取决于置换剂的亲和力,也与置换剂与介质的结合过程相关；介质内荧光强度的分析表明,eGFP置换首先发生在介质的外层,PAS浓度的降低导致置换速率下降.这与置换色谱的结果相吻合.CLSM不仅为蛋白置换动力学的研究提供了一种直观观测技术,CLSM结果也确认了蛋白质置换过程的复杂性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	史清洪	天津大学化工学院生物化工系	23	117	5.0	10.0
2	孙彦	天津大学化工学院生物化工系	82	902	16.0	26.0
3	石智聪	天津大学化工学院生物化工系	1	1	1.0	1.0