液质联用蛋白组学技术分析脑组织脂筏样品的属性*

• 作者: 张雪竹 聂坤 贾玉洁 赵岚 韩景献
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 膜脂质类 计算生物学 超速离心法 下丘脑 蛋白质类 基因组 脂筏
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 页码范围: 881-883
• 页数: 3页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2013.09.010

摘要

目的验证蔗糖密度梯度超速离心法提取脑组织脂筏的有效性。方法用蔗糖密度梯度超速离心法提取小鼠脑组织脂筏，采用免疫印迹法、双酶胆固醇检测法结合光散射度分析样品的脂筏属性，采用液质联用蛋白组学技术和生物信息学手段，对脂筏中的蛋白质细胞定位进行分析。结果超速离心法提取的脑组织脂筏具有典型的高散色度、高胆固醇和高表达Flotillin-1的脂筏特性；液质联用蛋白组学分析从脂筏样本中鉴定出647种蛋白质，这些蛋白质细胞定位大多是细胞膜、内质网、细胞骨架和细胞浆等常见的脂筏蛋白来源，这种脂筏样品是含有杂质的混合物，鉴定出的647种总蛋白中，有21%是细胞核、线粒体和核糖体等非脂筏来源蛋白。结论超速离心法是提取脑组织脂筏的有效方法，但应用中要考虑杂蛋白的影响。