基于蓖麻毒素B链的新型黏膜免疫佐剂设计及靶向效果初步评价

• 作者: 付凯飞 冯健男 王珍光 秦力维 赵强元 郭建巍
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蓖麻毒素B链 黏膜免疫 小分子肽 靶向分布
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 974-980,988
• 页数: 8页
• 分类号: R392
• 字数: 4005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2013.09.019

摘要

目的:利用自主知识产权抗体3E1,确定RTB与细胞特异性结合的活性肽部位,基因工程合成后,动物实验评价绿色荧光蛋白在基于RTB活性肽靶向下在体内的分布,为后续研究奠定基础.方法:用生物信息学技术,确定RTB与细胞特异性结合的活性肽部位;分子克隆技术构建含不同肽的绿色荧光蛋白原核表达载体,实现肽-GFP融合蛋白在大肠杆菌中的高效、可溶性表达;动物实验评价小鼠舌下口服肽-GFP融合蛋白后GFP在体内的分布.结果:建立了自主知识产权单抗3E1与RTB相互作用的空间构象,判定出四个活性区域,构建了4个含不同活性肽的GFP原核表达载体,获得了高纯度蛋白;经舌下口服免疫BALB/c小鼠后,免疫组化和流式细胞术证实,P1-GFP免疫组GFP和CD11c在不同组织中的分布与对照组有明显区别.P1-GFP初次免疫后,GFP主要分布于空肠,再次免疫后,GFP主要集中于回肠、肠相关淋巴组织和小肠PP结;初次免疫后CD11c+细胞主要分布于肠系膜淋巴结,胃和空肠,再次免疫后肠系膜淋巴结中的CD11c+细胞不再占优势,空肠中CD11c+细胞明显增加.结论:基于RTB的活性肽P1与GFP融合蛋白口服免疫小鼠后,P1-GFP经P1肽的导向,初次和再次免疫后GFP在体内的分布不同,再次免疫后范围更广.P1的导向使GFP直接进入小肠PP结和肠系膜淋巴结两个黏膜免疫应答的主要诱导及效应部位,利于免疫应答的发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯健男	军事医学科学院基础研究所	50	151	7.0	8.0
2	郭建巍	海军总医院检验科	56	244	9.0	12.0
3	赵强元	海军总医院检验科	59	239	8.0	10.0
4	付凯飞	海军总医院检验科	15	26	3.0	4.0
5	秦力维	海军总医院眼科	20	34	4.0	4.0
6	王珍光	海军总医院检验科	20	141	7.0	11.0