HHIP基因CpG岛高甲基化水平参与胃癌的发生

• 作者: 丰宇芳 宋宇 左云 徐志英 涂建成
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人音猬因子相互作用蛋白基因 胃癌 甲基化
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 590-596
• 分类号: R735.2|R730.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2013.05.015

摘要

目的:观察人胃癌、癌旁组织与胃癌AGS细胞中人音猬因子相互作用蛋白(human hedgehog interacting protein,HHIP)基因启动子区域CpG岛的甲基化水平,探索其与胃癌发生的关系.方法:RT-PCR检测30例人胃癌组织、癌旁组织及AGS细胞中HHIP mRNA的表达,免疫组织化学方法和甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)分别检测胃癌组织和癌旁组织的HHIP表达和HHIP基因启动子区域甲基化状态.AGS细胞予甲基化转移酶抑制剂5-氮杂2'-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycitydine,5-Aza-dc)处理前后,RT-PCR、MSP和硫化测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)分别检测AGS细胞中HHIP mRNA表达、启动子区域甲基化水平变化、CpG岛甲基化位点数量的变化；分析HHIP基因启动子区CpG岛甲基化水平变化与HHIP mRNA表达水平变化之间的相关性.结果:胃癌组织中的HHIP mRNA(0.82±0.38vs1.60±0.26,P=0.000)和蛋白(0.51 ±0.03 vs 0.83 ±0.27,P＜0.05)的表达均低于癌旁组织,并且与年龄、性别、TNM分期、分化程度、淋巴结转移均无显著相关性(均P ＞0.05).癌旁组织中HHIP基因启动子区甲基化水平显著低于胃癌和AGS细胞[(17.7±3.59)％ vs (62.9±6.14)％、(99.7±0.67)％,均P＜0.05].AGS细胞在5-Aza-dc干预后HHIP mRNA表达明显增高(4.68 ±0.22 vs 0.21±0.12,P＜0.01),HHIP基因启动子区甲基化水平明显下降[(10.1±0.21)％ vs (90.2±0.67)％,P＜0.01],CpG岛甲基化位点明显减少,并且HHIP基因启动子区甲基化水平与mRNA表达呈负相关(r=-0.693,P=0.00).结论:HHIP基因启动子区CpG岛的高甲基化水平可能通过抑制HHIP基因表达参与胃癌的发生.